第204章 孙教授：打不过能加入吗？
    手术顺利结束。
    真是千篇一律的结局。
    真是，最好的结局。
    江河洗手，回到更衣间。
    从柜子里拿出沙糖橘，剥开。
    再尝一口，还是好吃的。
    一点都不涩，但他不由得想起当年，好涩的当年。
    小江同志在京交换学习的时候，在医院里被前辈们天天指著鼻子臭骂。
    好在无论多晚回到家，家中总有沈老师在等他。
    好温柔的沈老师呀。
    会放好热水，加入一些艾草，说是自学的中医料包，为了给小家省钱。
    然后她会半蹲在地上，替江河脱去袜子，再把他的脚浸入热水中。
    ——
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    假装嫌弃的去洗洗手，再绕到床上，给江河按摩。
    软软的声音在耳边响起：“江医生，今天辛苦啦。”
    江河一直觉得媳妇在这一块就是纯魅魔。
    明明她没有勾引的想法，只是单纯的想对自己好，但却风情万种。
    沈老师的按摩手法也很专业。
    问她跟谁学的，她说常常给奶奶按，练出来的。
    江河：讚美奶奶。
    按了一会儿之后。
    江河便仰起头，看向沈鈺的脸，忍不住捉住她的手腕，轻声问：“媳妇，你怎么对我这么好呀？”
    沈鈺会笑盈盈地说：“因为我钟意你呀。”
    他笑著捏捏她的脸颊：“又学粤语啦？”
    沈鈺嘿嘿一下，下巴抵著他的额头，说道：“系呀，我怕我不会说粤语，咱爸咱妈到时候不喜欢我————”
    江河忍不了了，猛地转过身就要去吻她。
    “哎呀別闹，泡脚呢————”
    沈鈺笑著躲闪，就是不给亲。
    江河嘖一声，直接將她扑倒在床上。
    被按在床上，沈鈺不再躲了，无处可躲。
    江河双臂撑在她耳畔。
    沈鈺也静静地回望。
    两人的眼睛里，是满满当当、快要溢出来的爱意。
    对视了片刻，沈鈺勾住江河的脖颈，吻了上来。
    江河也熟练地把手抚上。
    吻了好一会儿之后，沈鈺微微喘著气退开半寸，点了点江河的嘴唇，心疼道：“你的嘴巴好干啊，起皮了都。”
    说著，她侧过身，从床头柜上拿过一瓣沙糖橘。
    將橘肉含进嘴里，咬破果肉，重新凑上前，將鲜甜的橘子汁水，嘴对嘴餵给他。
    太涩了。
    江河这还能忍得住？
    立刻將沈老师的睡裙掀到了腰际咚咚。
    有人敲门。
    江河回过神来，见杨煦在外面，手里也拿著个橘子在剥。
    老师看见江河盯著橘子不语。
    便把手里剩下的半个递给江河：“吃不？”
    江河嘆了口气：“行。”
    “我跟阿婆说了，手术很成功，肿瘤切得很乾净，胆肠吻合也很顺利，人已经平安送去icu观察了，老太太一听，差点要跪下，被护士长拉住了，这老赵一家，不容易啊。”
    江河不语，一味吃橘。
    杨煦想了想，道：“江河，你在此地不要走动，我想去买点橘子。”
    江河：“？”
    一时间摸不清楚老师是在占便宜还是讲真的。
    杨煦继续说：“咱们科室最近大家都挺辛苦的，连轴转，我想著，乾脆直接找老太太买个几百斤橘子，给科室里的医生护士都分分，权当是发点福利。”
    江河听懂了，温和道：“行，老师，顺便帮我也买些吧，我带回学校去，给班上的同学分点，项目组那边最近熬夜多，正好也给大家尝尝。”
    杨煦笑了：“你小子，现在是独立医疗组长，拿副高待遇了，起码买两百斤。”
    “好，没问题，学校人多，总分的完。”
    医院冷冷的灯光下。
    两人是满满的善意。
    “说起项目组————”杨煦咳嗽一声，“咱们今天也没別的手术安排了，正好，去一趟学校？”
    江河歪头：“去学校干嘛？”
    “去看看你们那个mirna早筛项目做得怎么样了啊，作为你的导师，我得时刻关注你的科研进度，再说了，买橘子的事也得跟他们说一声，顺便————带几个现成的橘子给他们尝尝。”
    江河心中一乐。
    看项目是假，送橘子是假。
    想去见王晓晴教授才是真！
    “好的老师，走吧。”
    去南医大的路上，杨煦亲自开车。
    “江河啊，王教授他们在实验室，有没有什么难点？”
    江河隨口答道：“刚卡在rna提取这一步，血清里的游离核酸含量太低，蛋白又多，trizoi法很容易带入杂质，a260/280的比值一直上不去。”
    “那你们现在是怎么解决的？”杨煦开始套话。
    ——
    江河笑了笑，心中瞭然，便详细地讲解了一下：“双重氯仿抽提，加糖原共沉淀，第一次加氯仿离心后，吸取上清液，移入新的离心管，再加一次等体积的氯仿进行第二次离心，这样可以最大限度去除蛋白污染，浓度不够的问题，就在加异丙醇沉淀前，补5微升5mg/ml的糖原作为共沉淀剂。”
    杨煦连连点头。
    半小时后，两人提著一袋橘子，来到学校实验室。
    听到推门声，眾人抬起头。
    “杨主任？”
    “老大？”
    “来来来，大家先停一下手里的活，休息十分钟。”杨煦热情地招呼著，“这是我跟江河特意给你们带的沙糖橘，尝尝，甜得很。”
    眾人闻言，纷纷围了过来。
    王晓晴也拿起一个橘子剥开。
    杨煦状似自然的站到王晓晴旁边。
    隨口说道：“我看你们这进度，是在做rna提取的最终洗涤吧？”
    王晓晴点头：“嗯，江河刚定下的方案，这批是用双重氯仿法跑的，还在等离心结果。”
    “双重氯仿法，是个好思路。”
    杨煦道：“血清样本和组织样本不一样，trizol试剂用在血清上，最大的痛点就是蛋白含量超標，你们在吸取水相上清液的时候，稍有不慎就会把中间的蛋白层带出来，这会导致下游逆转录直接失败。”
    “所以，牺牲第一次的取液量来换取纯度是极其必要的，把第一次吸出的上清液，再加一次等体积的氯仿，剧烈震盪后进行二次离心，这样一来，蛋白杂质基本就被洗乾净了。”
    几个学生都纷纷点头。
    杨教授不愧厉害。
    说的跟江河说的一模一样。
    王晓晴也有些意外地看向杨煦：“杨主任，你对基础分子实验也这么有研究？”
    杨煦故作谦虚：“医学是不分家的嘛，临床和基础本来就是相辅相成的，再说了，你们这套方案，为了补足二次抽提带来的浓度流失，肯定在沉淀前加了东西吧？”
    王晓晴再度惊讶，乖巧点头：“確实。”
    “5微升，5mg/mi的糖原，糖原作为共沉淀剂，不影响下游的pcr扩增，还能让微量的rna在管底形成肉眼可见的沉淀团块，我说的对吧？”
    “对的对的。”
    王晓晴觉得杨煦有点厉害了，稍有些崇拜。
    杨煦心里乐开了花，脸上云淡风轻。
    他转过头，看了江河一眼，挑了挑眉毛。
    江河默默地剥开一个橘子，把目光偏向窗外，看天。
    想装就装吧，谁让你是我老师呢。
    休息时间结束。
    实验重新运转。
    接下来的环节是沉淀后的无水乙醇洗涤。
    王晓晴准备亲自操作移液枪。
    杨煦在她旁边轻声提醒，美其名曰指导：“王教授，样本沉淀物很小，洗涤的时候，枪头最好贴著管壁对侧下去。”
    “我知道。”
    “吸的时候慢一点，拇指控制好二挡的回弹力度。”
    “杨主任，你挡著我光了。”
    “哦哦，抱歉，习惯性盯紧细节。”
    就在这时，许久未见的孙长明教授来串门了。
    “哎哟，都在忙呢？”
    他今日看著心情不错，背著手，春风得意的。
    目光扫过全场，看见杨煦也在，笑意更深：“老杨也在啊？怎么，今天医院不忙啊？”
    杨煦脸上的笑容一下就消失了，道：“来看看项目进度，你来干什么？”
    “我？我是来分享学术经验的。”
    孙长明悠然道：“你们还在搞rna提取？设备用得还习惯不？”
    杨煦冷漠：“挺好的，不劳孙教授费心。”
    孙长明嘿嘿一笑：“老杨啊，其实我今天过来是想说，我们研究所那边，消化道肿瘤的rna提取纯化，刚刚取得了重大突破。”
    此话一出，实验室里的眾人都抬起了头。
    孙长明：“大家都知道，消化液和血清里的rna极其容易降解，我们团队花了一个月的时间，反覆调整试剂配比，终於摸索出了一套极限纯化的办法。”
    王晓晴好奇道：“噢？说来听听。
    孙长明坐直了身体，开始长篇大论：“最重要的就是放弃传统的trizol，我们採用了硅胶膜离心柱法结合多重酶解，首先，在裂解阶段加入高浓度的蛋白酶k，56度水浴消化一个小时，然后，利用离心柱进行过柱，为了洗掉多糖杂质，我们专门配製了一种含高浓度盐酸胍和异丙醇的洗脱液，反覆洗脱三次。”
    “虽然这个流程耗时要四个多小时，成本也高，但纯度那是没得说，a260/280的比值，我们稳定做到了1.75以上！这在当前的液体活检领域，绝对是领先水平！”
    说完，孙长明往椅背上一靠，端起桌上的水杯喝了一口，等待著惊嘆声。
    1.75的纯度，在08年，確实值得骄傲。
    然而，实验室里眾人的表情都怪怪的。
    大家面面相覷，好像不知道该说什么好。
    孙长明皱了皱眉：“怎么？没听懂？也是，这套酶解过柱的体系確实复杂了点，你们刚接触湿实验，慢慢来————”
    “不是，孙教授。”陈浩默默地举起了手，“我有个问题。”
    “你说。”孙长明点点头。
    陈浩语气真诚地发问：“既然是要解决蛋白污染和降解的问题，为什么一定要用蛋白酶k去水浴消化一个小时，还要花那么高成本去买离心柱反覆洗脱呢？”
    孙长明愣了一下：“不用这些，你怎么去蛋白？怎么提纯？”
    陈浩理所当然地回答：“双重氯仿抽提，加糖原共沉淀啊，我们老大提出来的这个方法，牺牲点第一次的上清液体积，再加一次氯仿离心，蛋白就全沉下去了，然后补5微升糖原把rna析出来，整个流程下来四十分钟就搞定了，效果很好呀，为什么要搞得像你那么复杂？”
    孙长明：“？”
    反应了半天后，孙长明抗拒道：“不对，氯仿確实能去蛋白，但你抽提两次，水相里的rna早就流失得七七八八了，就算加了糖原，浓度也绝对达不到下游要求，纯度就更別提了，能过1.5都算你们运气好。”
    “可是————”蔡卓群在旁边忍不住插嘴。
    “没什么可是的，科研需要的是严谨，你们用这种糙办法，跑出来的数据全都是假阳性或者直接假阴性。”
    就在这时，很巧嗷。
    离心机跑的新一批內容出来了。
    陈浩道：“孙教授，数据是不是真的，测一下就知道了。”
    蔡卓群立刻上前，打开离心机盖，加入无酶水，溶解。
    nanodrop分光光度计前。
    1微升的样本滴入基座。
    测量！
    屏幕刷新，一排数据跳了出来。
    浓度：14.5ng/ul。
    a260/280：1.95。
    a260/230：2.03。
    孙长明：“啊？”
    1.8到2.0是rna纯度的完美区间。
    他引以为傲、耗时四小时、加了各种昂贵试剂才跑出的1.75。
    可这个呢？
    1.95是什么鬼啊！
    “换一管，再测。”孙长明不信邪。
    蔡卓群依言换了第二个样本。
    浓度：13.8ng/ul。a260/280：1.92。
    第三管。
    浓度：15.1ng/ul。a260/280：1.96。
    极其稳定的高纯度，完美的数据重现性，没有任何悬念的绝对碾压。
    孙长明，不嘻嘻。
    陈浩在旁边补了一刀：“孙教授，你看，四十分钟提出来的，效果是不是比你那个好多了？”
    杨煦绷不住了，哈哈大笑：“老孙啊，你那个蛋白酶k水浴一小时的方法，確实挺有创意的，就是费时费力还费钱，没关係，坚持你的想法，相信你一定行！”
    孙长明沉默半天，最后也客气的笑道：“嗯————数据还算凑合吧，不过，不同组织的样本特性不一样，你们这套方法在血清上管用，在我们消化道黏液样本上，未必適用，科研嘛，就是要在不同的方向上多做尝试，加油吧。”
    “哎呀，想起来了，我培养箱里的那些细胞还没换液呢，今天就不跟你们多聊了，走了啊。”
    他说完，便朝门口走去。
    轻轻的他走了，正如他轻轻的来，挥一挥衣袖，不带走一丝云彩~
    出门。
    孙长明伸手捂住胸口，喘不上气。
    呃啊，难受啊！
    “双重氯仿————糖原————”
    孙长明一边扶著墙往研究所走，一边在嘴里反覆念叨著这几个词。
    “妈的，这小子到底怎么想出来的？这哪来的方法？我什么时候能跟他一起做实验？”
    孙教授试图依赖江河。
    要不把项目组解散算了，打不过就加入吧？
    王教授不都加入学生团队了吗，我就不行？
    嗯————现在还来得及吗？
    有没有什么优雅的投靠姿势？在线等，挺急的。

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